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微生物实验室一般由准备室、普通实验室、灭菌室、恒温培养室和无菌室五部分组成。下面中南和大家介绍一下关于建设微生物细胞培养实验室的设计标准:
准备室
准备室主要用于配备培养基和样品处理等。准备室不仅要洗刷器皿,还需要配有存放器具、试剂柜或材料的实验台、专柜、冰箱、电炉和电源、上下水道等。同时室内还应设有加热器、蒸锅,洗刷器皿用的盆、桶等,还应有各种去污粉、瓶刷、洗衣粉、肥皂等。
普通实验室
普通实验室主要是进行微生物的观察、计数和生理生化测定工作的场所。普通实验室内的陈设因工作侧重点不同还有很大的差异。一般均需配备显微镜、实验台、柜子和凳子。实验柜要足以容纳日常使用的用具及药品,同时还需要达到平整、光滑的要求。
恒温培养室
1.培养室内设备及用具
①外室应有专用的工作服、鞋、帽、口罩、手持喷雾器和5%石炭酸溶液、70%酒精棉球等。
②内室通常配备培养架和摇瓶机(摇床)。常用的摇瓶机有旋转式、往复式两种。
2培养室的灭菌、消毒
①同无菌室的灭菌、消毒措施。
②小规模的培养可不启用恒温培养室,而在恒温培养箱中进行。
3.培养室的设置
①内外室都应在室中央安装紫外线灯,以供灭菌用。
②为满足微生物对温度的需要,需安装恒温恒湿机。
③分隔内室与外室的墙壁上部应设带空气过滤装置的通风口。
④培养室应有内、外两间,内室是培养室,外室是缓冲室。房间容积不宜大,以利于空气灭菌,内室面积在3.2×4.4=14m2左右,外室面积在3.2×1.8=6m2左右,高以2.5m左右为宜,都应有天花板。
灭菌室
灭菌室主要用于培养基的灭菌和各种器具的灭菌,灭菌室内应备有高压蒸汽灭菌器、烘箱等灭菌设备和设施。
无菌室
无菌室也可称之为接种室,主要用于系统接种、纯化菌种等无菌操作的专用实验室。在微生物工作中,菌种的接种移植是一项主要操作,这项操作的特点就是要保证菌种纯种,防止杂菌的污染。在一般环境的空气中,由于存在许多尘埃和杂菌,很易造成污染,对接种工作干扰很大。
1无菌室工作规程
①无菌室灭菌。每次使用前开启紫外线灯照射30min以上,或在使用前30min,对内外室用5%石炭酸喷雾。
②用肥皂洗手后,把所需器材搬入外室;在外室换上已灭菌的工作服、工作帽和工作鞋,戴好口罩,然后用2%煤酚皂液将手浸洗2分钟。
③将各种需用物品搬进内室清点、就位,用5%石炭酸在工作台面上方和操作员站位空间喷雾,返回外室,5~10min后再进内室工作。
④接种操作前,用70%酒精棉球擦手;进行无菌操作时,动作要轻 缓,尽量减少空气波动和地面扬尘。
⑤工作中应注意安全。如遇棉塞着火,用手紧握或用湿布包裹熄灭,切勿用嘴吹,以免扩大燃烧;如遇有菌培养物洒落或打碎有菌容器时,应用浸润5%石炭酸的抹布包裹后,并用浸润5%石炭酸的抹布擦拭台面或地面,用酒精棉球擦手后再继续操作。
⑥工作结束,立即将台面收拾干净,将不应在无菌室存放的物品和废弃物全部拿出无菌室后,对无菌室用5%石炭酸喷雾,或开紫外线灯照射30min。
2.无菌室的设置
无菌室应根据既经济又科学的原则来设置。其基本要求有以下几点:
①无菌室容积小而严密,使用一段时间后,室内温度很高,故应设置通气窗。通气窗应设在内室进门处的顶棚上(即离工作台最远的位置),最好为双层结构,外层为百叶窗,内层可用抽板式窗扇。通气窗可在内室使用后、灭菌前开启,以流通空气。有条件可安装恒温恒湿机。
②无菌室应有内、外两间,内间是无菌室,外间是缓冲室。房间容积不宜过大,以便于空气灭菌。最小内间面积2×2.5=5m2,外间面积1×2=2m2,高以2.5m以下为宜,都应有天花板。
③在分隔内间与外间的墙壁或“隔扇”上,应开一个小窗,作接种过程中必要的内外传递物品的通道,以减少人员进出内间的次数,降低污染程度。小窗宽60cm、高40cm、厚30cm,内外都挂对拉的窗扇。
④内间应当设拉门,以减少空气的波动,门应设在离工作台最远的位置上;外间的门最好也用拉门,要设在距内间最远的位置上。
3.无菌室的灭菌消毒
①喷雾:在每次使用无菌室前进行。喷雾可促使空气中微粒及微生物沉降,防止桌面、地面上的微尘飞场,并有杀菌作用。可用5%石炭酸喷雾。
②薰蒸:这是无菌室彻底灭菌的措施。无菌室使用了较长时间,污染比较严重时,应进行薰蒸灭菌。可用甲醛、乳酸或硫磺薰蒸。
③紫外线照射:在每次使用无菌室前进行。紫外线有较好的杀菌效果。通常应开启紫外线灯照射30~60min。
4.无菌室内设备和用具
①在内室和外室各安装一个紫外灯(多为30W)。内室的紫外线灯应安装在经常工作的座位正上方,离地面2m,外室的紫外线灯可安装在外室中央。
②无菌室内的工作台,不论是什么材质、用途的,都要求表面光滑和台面水平。
③内室应有酒精灯、常用接种工具、不锈钢制的刀、剪、镊子、70%的酒精棉球、工业酒精、载玻璃片、特种蜡笔、记录本、铅笔、标签纸、胶水、废物筐等。
④外室应有专用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有来苏儿水的瓷盆和毛巾、手持喷雾器和5%石炭酸溶液等。
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